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목적 : 난치성 망막질환을 치료하기 위한 유도만능줄기세포(iPSC) 유래 세포치료제 개발 및 임상 적용이 꾸준히 진행중에 있다. 대부분의 난치성 망막질환이 망막색소상피세포 및 광수용체의 동반 소실을 보이기 때문에 이식을 위해서는 두가지 세포가 모두 필요하지만 비교적 분화기간이 짧고 분화효율이 양호한 망막색소상피세포에 비해, 광수용체의 경우 그 분화기간이 길고 분화효율이 낮은 것으로 알려져 있다. 따라서 유도만능줄기세포를 이용한 효율적 광수용체 분화 프로토콜을 연구하고자 하였다.
방법 : Retroviral vector 를 이용하여 Yamanaka's 4 factor (OSKM) 을 과발현한 CRL1, CRL2, IMR40 iPSC를 이용하여 다양한 분화유도 signal의 조합 및 배양 조건에 따른 분화효율을 조사하였다.
결과 : 1. 분화 중 Embryoid body의 크기 및 형태에 따라 다른 분화양상 및 분화효율이 관찰되었다.
2. PDMS, Aggrewell 등 구조지지체를 이용한 경우 분화효율의 증가가 관찰되었다.
3. 다양한 분화유도 signal 중 Noggin 과 DKK1 이 포함된 분화 프로토콜에서 분화효율의 증가가 관찰되었다.
결론 : 다양한 시도를 통해 유도분화 줄기세포의 분화효율 증가를 관찰할 수 있었으며, 향후 분화한 세포의 기능적 성숙도 및 이식 후 생착 등의 연구를 진행할 예정이다.
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