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목적 : Second harmonic generation 영상 기법을 사용하여 촬영한 인간 각막 윤부의 콜라겐 구조를 보고하고자 함
방법 : 인간 공여 각막 중 이식이 불가능한 7개의 조직을 이용하여 Multiphoton microscope (FV-1000, Olympus)를 이용하여 각막 윤부에 대한 second harmonic generation (SHG) 영상을 촬영하였다. 영상에 사용된 자극용 레이저의 파장은 850nm이며, SHG는 410-440nm의 필터를 이용하여 획득하였다. 획득된 영상은 프리웨어인 ImageJ를 이용하여 분석하였다
결과 : palisade of Vogt 바로 아래에서 벌집 모양의 콜라겐 구조물이 모든 조직에서 관찰되었으며, 이 구조물의 두께는 약 50 µm까지 측정되었다. 이 구조물을 cribriform layer라 칭하였으며, 주변부 각막과 결막 및 테논낭과는 확연히 구분되는 양상이었다.
각막 윤부에 존재하는 미세혈관 고리부위에서 기시하여 주변부 각막 실질로 방사상으로 뻗어가는 콜라겐 구조물이 관찰되었으며, 깊이 150µm 정도까지도 관찰되었다. 이 방사상 콜라겐 구조물을 connection fiber라 칭하였고, 주변부 각막 전체에서 발견되었으며 표층부 (50µm 깊이) 에서는 500µm당 10개에서 11개, 심층부 (120 µm 깊이)에서는 6개에서 7개 정도의 밀도로 관찰되었다
결론 : 각막 윤부에서 SHG 영상기법을 사용하여 콜라겐 구조물을 효과적으로 관찰할 수 있었다. 새로 관찰된 cribriform layer와 connection fiber에 대한 추가 연구가 필요하겠다
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