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목적 : 고장성 (hypertonicity) 및 고오스몰 농도 (hyperosmolarity) 환경에서 망막신경절세포 (RGC-5)의 전사인자인 TonEBP (Tonicity responsive enhancer binding protein)의 발현을 확인함으로써 망막신경절세포의 사멸을 방지하는 데 있어 TonEBP의 발현이 관여함을 알아보고자 하였다.
방법 : RGC-5 세포 배양 후 고장성 스트레스를 유발하기 위해 50 mM NaCl, 100 mM mannitol, 50 mM 및100 mM glucose를 3, 6, 12, 24 시간 처리한 후 Western immunoblotting을 시행하였고 50 mM NaCl, 100 mM mannitol, 50 mM glucose를 3, 6, 12, 24 시간 처리한 후 Real-time PCR을 시행하였다.
결과 : 50 mM NaCl 처리 3, 6 시간 및 100 mM mannitol 처리 6 시간 후, 그리고 100 mM glucose 처리 3, 6 시간 후에서 Western blotting을 통해 TonEBP가 발현되는 것을 확인할 수 있었으며 real-time PCR을 통한 TonEBP의 발현은 50 mM NaCl 처리 3 시간 및 100 mM mannitol 처리 3, 24 시간 후, 그리고 50 mM glucose 처리 3, 24 시간 후에서 통계적 유의성을 보였다.
결론 : Staurosporin으로 분화시킨 RGC-5 세포를 고장성 스트레스 환경에 노출시켰을 때 TonEBP가 발현되는 것을 단백질 및 mRNA 수준에서 확인할 수 있었다.
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