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목적 : 비타민 A의 결핍 마우스 안구에서 mucin 양과 bacteria flora 변화 여부와 Lacrimal의 면역활성 증가를 살펴보고자 하였다.
방법 : Balb/c마우스의 임신 확인 후, 비타민 A가 결핍된 사료를 먹이기 시작하여, 비타민 A가 결핍된 마우스를 생산한다. 그 뒤 12주동안 비타민 A 결핍 사료를 먹여 비타민 A가 부족한 상태를 지속시켜 실험에 사용한다. 12주령 된 마우스 안구 표면의 flora 증가 여부와 종류는 LB배지 배양과 16s RNA 방법을 이용하여 확인한다. 그 후 PAS 염색과 Dot Blot 방법을 이용하여 안구 결막과 눈물에서 goblet cell과 분비형 MUC5AC를 확인하며, ELISA를 이용하여 Lysozyme을 확인하였다. 또한 H&E 염색과 FACS방법을 이용하여 Lacrimal에서의 세포 침윤 정도와 세포 종류를 확인하였다.
결과 : 비타민 A가 결핍된 마우스의 결막에서 goblet cell이 줄어들었으며, 눈물에서 분비형 MUC5AC의 분비량도 감소한 것을 확인할 수 있었다. Gram negative인 안구 flora가 증가 되었으며, 눈물의 Lysozyme 포함 량이 증가되었다. 또한 Lacrimal duct 주변에 세포가 침윤하며, 그 세포들은 IFN-r를 분비하는 Th1 세포임을 확인하였다.
결론 : 비타민 A 결핍이 goblet cell의 분화와 MUC5AC의 분비에 영향을 끼치며, 그로 인해 안구의 bacteria flora가 증가하여 Lacrimal의 감염과 Lysozyme분비를 증가 됨을 알 수 있다.
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