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목적 : Human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) 에 Bevacizumab을 반복 처치하고 Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) 와 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor (VEGFR) 발현을 관찰하고자 한다.
방법 : 0.1% O2 상태에서 HUVEC세포를 배양하고, Bevacizumab 1.0mg, 2.5mg/ml 을 17시간 동안 처치 후, 배지를 교체하고, 총 55시간 후 VEGF165, VEGFR1, VEGFR2 발현을 Western blot으로 조사하였다. 한편, Bevacizumab 1.0ng, 2.5ng/ml을 17시간 동안 처치 후, 배지를 교체하고, 7시간 경과 후 다시 Bevacizumab을 동일하게 처치하고 배지를 교체하는 과정을 2회 더 시행하고 VEGF165, VEGFR1, VEGFR2 발현을 Western blot 으로 측정하였다. 또한, 각각의 조건에서 Ki67 발현을 유세포 분석기로 검사하였다.
결과 : Bevacizumab 1.0, 2.5mg/ml을 1회 처치한 경우 대조군에 비해 VEGF165 발현이 증가하였고 (p=0.02), 각각의 농도를 3회 반복한 경우 대조군와 유의한 차이는 없었다 (p>0.05, p>0.05). Bevacizumab 1.0, 2.5ng/ml을 1회 처치 시 VEGFR1과 VEGFR2는 대조군 보다 유의하게 증가하였고 (p=0.03, p=0.02), 3회 반복 처치 시 각각의 농도에서 대조군 및 1회 처치 시 보다 유의하게 증가 하였으며 (p=0.01, p=0.01), 1.0mg/ml농도를 반복처치 한 경우 가장 높은 발현을 보였다. 한편 각각의 조건에서 Ki 67발현은 유의한 차이가 없었다.
결론 : Bevacizumab 반복 처치 시 VEGF의 증가는 없었으나, VEGFR 발현증가를 관찰할 수 있었다. 따라서, VEGFR의 발현증가가 Anti-VEGF 조건에서 HUVEC 세포대사 유지에 중요한 기전으로 생각한다.
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