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목적 : 녹내장 쥐모델에서 안지오제닌 점안에 의한 안압하강효과가 확인되어, in vitro 상에서 섬유주세포를 이용하여 안지오제닌에 의한 방수유출증가의 분자생물학적인 기전을 밝히고자 하였다.
방법 : 면역조직화학 염색을 통하여 쥐 안구 내 안지오제닌의 발현양상을 확인하고, 녹내장 모델에서 안지오제닌 점안에 따른 전방각 내 조직학적 차이를 관찰한다. 또한 안압하강효과의 기전을 분석하기 위해 정상 및 녹내장 섬유주세포에서 방수유출과 관련된 특정 인자(MMP-1,3, nitric oxide synthase, Akt 등)의 발현 및 인산화 정도를 real time-PCR 및 western blot을 이용하여 측정한다. 이후 섬유주세포 내 안지오제닌 처리에 의한 세포골격 변화와 녹내장 세포주 내 안지오제닌 처리에 따른 방수유출 조절인자의 발현 및 인산화 변화를 측정한다.
결과 : 조직 내 섬유주세포와 쉴렘관 부위에 안지오제닌이 강하게 발현되는 것을 관찰하였으며, 녹내장 모델에서 안지오제닌 점안 후 쉴렘관의 확장과 세포간 간격 증가가 관찰되었다. 녹내장과 정상섬유주 세포주 간에 방수유출인자의 발현 차이를 확인하였으며, 녹내장 세포주에 안지오제닌 처리 후 세포간 거리확장 및 lamellipodia형성을 통한 세포골격의 변화도 확인되었다. 또한, real time-PCR 분석 상 안지오제닌에 의해 섬유주 내 세포외 기질 재형성 관련인자인 MMP1,3의 발현 증가가 관찰되었으며, MMP1,3 단백질 발현의 증가뿐 아니라 Akt, eNOS, P70S6K의 인산화가 증가함을 western blot으로 확인하였다.
결론 : 안지오제닌에 의한 안압하강 효과는 섬유주세포 내 안압하강 관련 단백질의 변화와 세포외기질의 재형성에 따른 방수 유출의 증가 기전이며, 조직학적으로 전방각 내 쉴렘관의 확장과 섬유주 내 세포의 변화에 기인한다. 이는 MMP 계열에 의한 기질 재형성과 PI3K/Akt/mTOR pathway 및 NO pathway에 의한 이완작용 등 복합적인 기전을 통해 조절되는 것으로 사료된다.
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